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夾芯式垂直電泳槽的使用方法

更新時(shí)間:2017-03-14      瀏覽次數(shù):2595

如何使用電泳槽

夾芯式垂直電泳槽使用方法:
一、組成部件
(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對(duì),配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。
(二)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時(shí)根據(jù)需要選擇適當(dāng)厚度的玻璃板及梳子配套使用。
(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。
(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對(duì),28D、30型為5對(duì)。
(五)橡膠管五根。兩根長(zhǎng)的用于連接冷卻水的出入口;中等長(zhǎng)度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;較為短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。
(六)導(dǎo)線(xiàn)1付。二、使用方法
(一)清洗部件
上述部件組裝前要*清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑*清洗干凈。清洗后的玻璃板應(yīng)放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
(二)組裝電泳槽
A、1、將四只固定螺桿插進(jìn)一只貯液框(半上槽)的相應(yīng)孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上。
2、左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠??騼?nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。
3、將帶有玻璃的橡膠??蜃臃旁谘龇诺馁A液槽框架上,其下緣必須對(duì)齊貯液槽框下緣。
4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線(xiàn)位于貯液槽有機(jī)玻璃框中央。
5、裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻,用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。
6、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱(chēng)上槽(陰),帶長(zhǎng)玻璃板的貯液槽稱(chēng)為下槽(陽(yáng)),在長(zhǎng)玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長(zhǎng)玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂*凝固后才能灌膠。
B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠??蛑苯臃湃氩壑校瑢?duì)稱(chēng)擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。
(三)灌膠
1、先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
2、用細(xì)頭滴管吸取膠液,沿長(zhǎng)、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。
3、為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能*過(guò)短玻璃板上緣。
4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
射率不同的亮區(qū)。
(四)加樣
1、松開(kāi)連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內(nèi)的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。
2、雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線(xiàn)清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬(wàn)不要碰壞孔沿的字面)。
3、在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應(yīng)*過(guò)上貯液槽短玻璃板上緣。
4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長(zhǎng)、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動(dòng)作要輕,針頭不能碰壞膠面)。
(五)電泳
一貯液槽導(dǎo)線(xiàn)與電泳儀的負(fù)極相連,下貯液槽導(dǎo)線(xiàn)與電泳儀的正極相連。檢查線(xiàn)路無(wú)誤,方可按照所要求的電壓電流進(jìn)行電泳。


 

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