凝膠成像系常見問題的簡要分析

更新時(shí)間：2017-06-19

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凝膠成像即對DNA/RNA/蛋白質(zhì)等凝膠電泳不同染色（如eb、考馬氏亮藍(lán)、銀染、sybr green）及微孔板、平皿等非化學(xué)發(fā)光成像檢測分析。凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算，密度掃描，密度定量， PCR定量等生物工程常規(guī)研究。

1、凝膠成像系統(tǒng)的原理？
樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析，就可以確定它的成份和性質(zhì)。
樣品對投射或者反射光有部分的吸收，從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度，通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻，較為大限度的消除了光密度不均造成的對結(jié)果的影響。
2、凝膠成像的適用范圍？
1．蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。
2．可以確定生物分子的分子量。
3．可以應(yīng)用于生物分子的定量分析中。

3、凝膠成像一般操作步驟？
1．打開凝膠成像系統(tǒng)開關(guān)。
2．打開電腦，系統(tǒng)自動打開并進(jìn)入成像軟件。
3．打開凝膠成像系統(tǒng)前面板，選擇使用紫外透射光源或者白光透射光源，將相應(yīng)光源安放到位。
4．將樣品放置在透射光源的樣品臺上。
5．在成像操作界面里面選擇使用Upper white光源，點(diǎn)擊綠色（即時(shí)成像）按鈕。

4、是不是像素越高，產(chǎn)品就越好？

像素是要針對成像設(shè)備來看的，比如數(shù)碼相機(jī)與CCD的像素就不具備可比性，其次CCD本身的質(zhì)量比單純的像素高低更重要。對于同級別CCD較為重要的指標(biāo)是其大小，也就是CCD尺寸，尺寸越大其本身價(jià)值就成幾何倍地增長。

5、配件紫外反射燈源的主要用途為何？

紫外反射燈源使用并不廣泛，主要是提供非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由于比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠，透射光源*可以滿足，因此將紫外反射光源作為選配件不列入標(biāo)配中。