巴玖講解酶標(biāo)儀的選擇、自檢和校準(zhǔn)

更新時(shí)間：2019-05-04

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酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)從上述所獲的酶標(biāo)儀性能的有關(guān)信息資料，基本上可以說是間接的，有了目標(biāo)以后，如果還想獲得對(duì)某一酶標(biāo)儀的感性認(rèn)識(shí)，可以對(duì)其進(jìn)行自檢，主要有下述幾個(gè)方面。
(一)外觀
酶標(biāo)儀上應(yīng)有儀器名稱，型號(hào)，編號(hào)，生產(chǎn)廠家，出廠日期和電源電壓；各調(diào)節(jié)旋鈕，按鍵和開關(guān)均能正常工作，外表面無明顯機(jī)械損傷；顯示文字應(yīng)清楚完整。
(二)酶標(biāo)儀的穩(wěn)定性(漂移)
選用492nm波長，在吸光度o．0A處，測(cè)定標(biāo)稱值為1．0A的光譜中性濾光片(測(cè)定操作按儀器說明進(jìn)行)，記錄儀器示值或均值，10min后再次記錄儀器示值或均值，前后兩次測(cè)定值之差不應(yīng)*過±0．00。
(三)吸光度測(cè)定的準(zhǔn)確度
選用405，492和620 nm波長，以空氣為參比，分別測(cè)定標(biāo)稱值為0．5和1．0A的光譜中性玻璃濾光片，用測(cè)試板代替酶標(biāo)板，按儀器說明連續(xù)測(cè)定3次，按下式計(jì)算準(zhǔn)確度：AA＝1／3(A、+A。+A3)—A：(A：為標(biāo)準(zhǔn)值)。
(四)吸光度測(cè)定的重復(fù)性
波長選擇同(3)，在酶標(biāo)板排加注空白溶液，第二排加入濃度為200rig／ml的重鉻酸鉀溶液，重復(fù)測(cè)定5次。記錄每次測(cè)定的第二排吸光度值，取第二排任一孔吸光度值與各次對(duì)應(yīng)孔吸光度值。按下式計(jì)算重復(fù)性：

（五）酶標(biāo)儀的線性
選用540nm波長，將標(biāo)稱值o．5，1．0A中性濾光片分別放入測(cè)試板樣本位置中，以空氣為參比，各重復(fù)測(cè)定3次；然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于測(cè)試板的同一孔位中，重復(fù)測(cè)定3次。線性誤差：

式中A1為片中性濾光片吸光度均值，A：為第二片中性濾光片吸光度均值，A1，2為兩片中性濾光片疊加后的吸光度均值。
(六)測(cè)定速度的檢定．
選用492nm波長，放人96孔酶標(biāo)板進(jìn)行測(cè)定，用秒表計(jì)測(cè)儀器打印出全部數(shù)據(jù)的時(shí)間。
酶標(biāo)儀除了在選購時(shí)，應(yīng)盡可能自檢外，在使用中也應(yīng)定期檢定，以保證酶標(biāo)儀測(cè)定的有效性。

附：200ttg／ml重鉻酸鉀溶液的配制
將重鉻酸鉀固體試劑放人稱量瓶中(去蓋)置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器內(nèi)冷卻30min，在分析天平上準(zhǔn)確稱取o．2829g，置于100ml燒杯中，用o．05mol／L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o．05mol／L稀硫酸洗燒杯3次，洗液并入容量瓶中，用0．05mol／L稀硫酸稀釋至刻度線，搖勻。

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