nanodrop one微量分光光度計的使用方法

更新時間：2021-03-30

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美國nanodrop one光度計使用

Nanodrop是實驗室中常見的分光光度計。與傳統(tǒng)需要比色皿的分光光度計相比，Nanodrop所需樣品的體積大大減少，只需要2 μL，同時也大大降低了實驗準備以及清洗的時間。這些優(yōu)勢使得科研人員能夠在一分鐘內檢測多個樣品。當然如果你有更多的樣品，還嫌效率不夠高，你可以選擇應用Nanodrop 8000系統(tǒng)，它能夠同時檢測8個樣品。

Nanodrop能夠在包括紫外及可見光區(qū)域在內的光譜范圍內檢測樣品的吸光度信號。在實驗開始前，需要在儀器的軟件內設置檢測樣品的種類，包括蛋白質，DNA, RNA等。根據吸光度,能夠計算樣品的濃度。DNA及RNA 在260 nm處有吸收度，蛋白質在280 nm處有吸收峰值。濃度與吸光度的對應關系見下表。當然表中濃度與吸光度對應關系成立的前提是樣品必須具有很高的純度。樣品純度可以通過A260/280判定，其臨界值可參考下表。大家可能注意到，RNA的A260/280比值要比DNA的值高一些，這是因為堿基U的A260/280的比值要比堿基T的A260/280比值更高。

吸光度	樣品	樣品濃度	高純度樣品標準（A260/280 ）
A₂₆₀ =1	雙鏈DNA	50 μg/ml	<1.8
	單鏈DNA	33 μg/ml	<1.8
	單鏈RNA	40 μg/ml	>2.0
A₂₈₀ = 1	蛋白質	1 mg/ml	<0.6

對Nanodrop檢測結果產生直接影響的因素就是樣品的純度。A260/280是檢測樣品純度的一個指標，但這個參數只衡量了蛋白質與核酸之間相互污染的情況。沒有考慮DNA與RNA之間彼此污染以及其他物質污染的情況，比如苯酚在270 nm附近具有較大的吸光值。

因此在利用Nanodrop檢測核酸濃度的時候，除了A260/280外，A260/230也是檢測樣品純度的一個指標，高純度DNA和RNA的兩個臨界值同樣是1.8以及2.0。A260/230在2.0-2.2之間是合理的數值。對于純的核酸，A260/230的值通常大于A260/280的值。核酸提取過程中殘留的有機物通常會對檢測結果產生影響。如果檢測結果顯示230nm處具有很大的吸光值，樣品很有可能被EDTA，碳水化合物或者硫氰酸胍等物質污染了。

Nanodrop的檢測范圍。對于核酸來說，Nanodrop的檢測濃度范圍在2ng-15μg/μL之間。所以當樣品的濃度很低時，比如從單個或少量細胞中提取的DNA或RNA，利用Nanodrop來測量濃度可能就不適合了。這時需要考慮其他的核酸定量方法比如熒光染料的方法。

此款符合人體工程學的獨立式分光光度計具有高分辨率和觸摸屏界面設計，使您離研究目標更進一步。強大的自動調節(jié)光程技術有助于準確測量濃縮樣品而無需稀釋。

Acclaro 樣品智能技術

Acclaro 技術可以在提供準確的定量測定的同時，增強用戶對樣品質量的了解。對污染物的早期鑒別能夠避免下游應用的失敗，從而節(jié)省故障排除的時間。

在數秒內驗證樣品結果 - 鑒別樣品污染物并獲得矯正的濃度結果。

通過警報獲取信息 – 通過提供相應的技術支持和解決問題向導，從而獲得樣品質量的即時反饋。

依靠準確結果——采用嵌入式傳感器和數字影像分析技術，確保測量完整性。

NanoDrop One/NanoDrop OneC 特點

同時包含基座和比色皿檢測模塊，以擴展實驗靈活性和擴大動態(tài)范圍。

測量稀釋樣品，執(zhí)行動力學實驗并獲取細菌培養(yǎng)物的光密度測量結果。

比色皿檢測模塊包括溫度控制和攪拌區(qū)域。

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